کیت ریل تایم پی‌ سی‌ آر سایتومگالوویروس

کیت ریل تایم پی‌ سی‌ آر سایتومگالوویروس : کیت CMV Real-time PCR به منظور انجام یک تست تشخیصی In vitro کیفی بر پایه‌‌ی تکنیک Probe-based real-time PCR طراحی شده است که برای تشخیص DNA ژنومی سایتومگالوویروس (CMV) در نمونه‌های بالینی حاصل از پلاسما و خون استفاده می‌شود. نتایج مثبت حاصل از انجام این تست، تاییدکننده‌ی وجود DNA ژنومی CMV است. لازم به ذکر است که نتایج مثبت حاصل از تست، ردکننده‌ی وجود سایر عفونت‌های باکتریایی و ویروسی همراه نمی‌باشد.

اساس تست: در این روش، یک ناحیهدر ژن54UL برروی ژنومCMV بعنوان هدفتشخیصی در فرآیندPCR تکثیر می‌شود. برای این منظور، ابتداDNA ژنومی با استفادهاز یککیتتجاریمعتبراستخراج می‌شودو بدنبال آن، واکنش تکثیرهدفژنومی انجام می‌شود. به‌منظور شناسایی ناحیه‌ی هدف از یک ست پرایمر و پروب اختصاصی الیگونوکلئوتیدی دارای فلوروفور و کوئنچر استفاده می‌شود. یک پروب‌ که دارای فلوروفور FAM است جهت شناسایی ژن 54UL و پروب دیگر دارای فلوروفور HEX است که جهت شناسایی بخشی از یک ژن Housekeeping انسانی بعنوان کنترل داخلی (control Endogenous )استفاده می‌شود. حین انجام PCR در صورت وجود ژنوم هدف، پرایمرها و پروب‌های اختصاصی به نواحی مربوطه متصل می‌شوند. به‌منظورتکثیر DNA هدف، آنزیم پلیمرازفعال شدهو شروع به سنتز رشته‌هایجدیدمی‌کند.در حین سنتز رشته‌هایجدید، این آنزیم با استفاده از فعالیت اگزونوکلئازی باعث هیدرولیز پروب‌های متصل شده به نواحی هدف مربوطه شده و در نتیجه کوئنچر از فلوروفور جدا شده و در نتیجه رنگ‌های فلوروسنت مختلف آزاد می‌شوند که دستگاه PCR time-Real قادر به خوانش و ثبت آن‌ها می‌باشد.در نهایت بعد از پایان واکنشPCR نتایج با استفاده از نرم افزار مربوطه آنالیز می‌شوند. الزمبه ذکر است که کنترل داخلی، جهت ارزیابی فرآیندنمونه‌گیری و استخراج ژنومویروسی کاربرددارد.